תקציר והסבר הבדיקה
לישמניאזיס קרביים, או Kala-azar, הוא זיהום מפושט הנגרם על ידי מספר תת-מינים של L. donovani.על פי הערכות ארגון הבריאות העולמי (WHO) פוגע בכ-12 מיליון בני אדם ב-88 מדינות.הוא מועבר לבני אדם על ידי עקיצות של זבובי החול Phlebotomus, אשר רוכשים זיהום מהאכלה מבעלי חיים נגועים.למרות שזו מחלה שנמצאת במדינות עניות, בדרום אירופה, היא הפכה לזיהום האופורטוניסטי המוביל בחולי איידס.זיהוי של אורגניזם L. donovani מהדם, מח העצם, הכבד, בלוטות הלימפה או הטחול מספק אמצעי אבחנה ברור.גילוי סרולוגי של אנטי-L.נמצא כי donovani IgM הוא סמן מצוין ללישמניאזיס ויסצרלי חריפה.בדיקות המשמשות במרפאה כוללות ELISA, נוגדן פלואורסצנטי או בדיקות אגלוטינציה ישירה 4-5.לאחרונה, שימוש בחלבון ספציפי ל-L. donovani בבדיקה שיפר באופן דרמטי את הרגישות והספציפיות.
ה-Leishmania IgG/IgM Combo Rapid Test היא בדיקה סרולוגית מבוססת חלבון רקומביננטי, המאתרת בו זמנית נוגדני IgG ו-IgM ל-L. Donovani.הבדיקה מספקת תוצאה אמינה תוך 15 דקות ללא כל מכשירים.
עִקָרוֹן
ה-Leishmania IgG/IgM Rapid Test הוא בדיקת אימונו כרומטוגרפית של זרימה צידית.קלטת הבדיקה מורכבת מ: 1) כרית מצומדת בצבע בורדו המכילה אנטיגן L. donovani רקומביננטי המצומדת עם זהב קולואידי (Leishmania conjugates) ו-IgG-gold conjugates של ארנב, 2) רצועת ממברנה ניטרוצלולוזה המכילה שתי פסי בדיקה (T1 ו-T2). ורצועת בקרה (להקת C).רצועת T1 מצופה מראש ב-IgM אנטי-אנושי חד שבטי לזיהוי אנטי-L.רצועת donovani IgM, T2 מצופה מראש בריאגנטים לזיהוי אנטי-L.donovani IgG, ורצועת C מצופה מראש ב-IgG נגד ארנב עז.
כאשר נפח הולם של דגימת בדיקה מופק לתוך באר הדגימה של הקלטת, הדגימה נודדת על ידי פעולה נימית על פני הקסטה.ה-L. donovani IgM אם קיים בדגימה ייקשר לצמידות ה-Leishmania.לאחר מכן, הקומפלקס האימונו נלכד על הממברנה על ידי נוגדן IgM אנטי-אנושי המצופה מראש, ויוצר פס T1 בצבע בורדו, המעיד על תוצאת בדיקה חיובית של L. donovani IgM.ה-L. donovani IgG אם קיים בדגימה ייקשר לצמידות ה-Leishmania.לאחר מכן, הקומפלקס האימונו נלכד על ידי הריאגנטים המצופים מראש על הממברנה, ויוצרים פס T2 בצבע בורדו, המעיד על תוצאת בדיקה חיובית של L. donovani IgG.
היעדר רצועות T כלשהן (T1 ו-T2) מעיד על תוצאה שלילית.הבדיקה מכילה בקרה פנימית (רצועת C) אשר אמורה להציג פס בצבע בורדו של קומפלקס האימונו של עז נגד ארנבת IgG/ארנב IgG-גולד מצומד ללא קשר להתפתחות הצבע בכל אחת מרצועות ה-T.אחרת, תוצאת הבדיקה אינה חוקית ויש לבצע בדיקה חוזרת של הדגימה עם מכשיר אחר.
