תקציר והסבר הבדיקה
מלריה היא מחלה המוליטית הנישאת על ידי יתושים, מחלת חום שמדביקה למעלה מ-200 מיליון אנשים והורגת יותר ממיליון איש בשנה.זה נגרם על ידי ארבעה מינים של Plasmodium: P. falciparum, P. vivax, P. ovale ו-P. malariae.הפלסמודיות הללו כולן מדביקות והורסות אריתרוציטים אנושיים, ומייצרות צמרמורות, חום, אנמיה וטחול.P. falciparum גורם למחלה חמורה יותר משאר המינים הפלסמודיים ומהווה את רוב מקרי המוות ממלריה.P. falciparum ו-P. vivax הם הפתוגנים הנפוצים ביותר, עם זאת, יש שונות גאוגרפית ניכרת בתפוצת המינים.
באופן מסורתי, מלריה מאובחנת על ידי הדגמה של האורגניזמים על גבי מריחות עבות של דם היקפי מוכתם של Giemsa, והמינים השונים של פלסמודיום נבדלים על ידי הופעתם באריתרוציטים נגועים1.הטכניקה מסוגלת לאבחן מדויק ומהימן, אך רק כאשר מבוצעת על ידי מיקרוסקופים מיומנים תוך שימוש בפרוטוקולים מוגדרים2, מה שמציב מכשולים עיקריים לאזורים המרוחקים והעניים בעולם.
ערכת הבדיקה המהירה של מלריה Pf / Pan Antigen פותחה לפתרון מכשולים אלו.הבדיקה מנצלת זוג נוגדנים מונוקלונליים ופוליקלונליים לחלבון ספציפי P. falciparum, היסטידין חוזר על חלבון II (PHRP-II), וזוג נוגדנים מונוקלונליים כדי לפלסמודיום פלסמודיום, כל כך מבדיל את הפלסמודיום והבדילציה של הפלסמודיום ובלתי-פרסולציה, או של פלסמודיום, או של פלסמודיום, או של פלסמודיום, או של פלסמודיום, או של פלסמודיום, או של פלסמודיום, שלושת פלסמודיות אחרות.זה יכול להתבצע על ידי צוות לא מאומן או מיומן מינימלי, ללא ציוד מעבדה.
עִקָרוֹן
ערכת הבדיקה המהירה של Pf/Pan Malaria היא בדיקה חיסונית כרומטוגרפית של זרימה רוחבית.רכיבי רצועת הבדיקה מורכבים מ: 1) כרית מצומדת בצבע בורדו המכילה נוגדן אנטי-PHRP-II של עכבר המצומד עם זהב קולואידי (מצומדי זהב-pHRP II) ונוגדנים נגד-pLDH של עכברים המצומדים בזהב קולואידי (מצומדי זהב-pLDH),
2) רצועת ממברנה ניטרוצלולוזה המכילה שתי פסי בדיקה (רצועות Pan ו-Pv) ורצועת בקרה (רצועת C).Pan band מצופה מראש בנוגדן אנטי-pLDH חד שבטי שבאמצעותו ניתן לזהות את ההדבקה בכל אחד מארבעת המינים של פלסמודיה, פס ה-Pf מצופה מראש בנוגדנים פוליקלונליים אנטי-pHRP-II לזיהוי זיהום Pf, ורצועת ה-C מצופה ב-IgG נגד עיזים נגד עכברים.
במהלך הבדיקה, נפח הולם של דגימת הדם מופק לתוך באר הדגימה (S) של קלטת הבדיקה, מאגר תמוגה מתווסף לבאר המאגר (B).המאגר מכיל חומר ניקוי המסנן את תאי הדם האדומים ומשחרר אנטיגנים פלסמודיום שונים, הנודדים בפעולה נימית על פני הרצועה המוחזקת בקסטה.pHRP-II אם קיים בדגימה ייקשר לצימודים של pHRP II-זהב.לאחר מכן, הקומפלקס האימונו נלכד על הממברנה על ידי נוגדני האנטי-pHRPII המצופים מראש, ויוצרים פס Pf בצבע בורדו, המעיד על תוצאת בדיקה חיובית של Pf.pLDH אם קיים בדגימה ייקשר לצמידות זהב pLDH.לאחר מכן, הקומפלקס האימונו נלכד על הממברנה על ידי הנוגדן האנטי pLDH המצופה מראש, ויוצר פס Pan בצבע בורדו, המעיד על תוצאת בדיקה חיובית של פלסמודיום.בהיעדר Pan Band, ניתן להמליץ על תוצאת בדיקה חיובית עבור כל אחת משלושת הפלסמודיות האחרות.
היעדר רצועות בדיקה כלשהן (Pan ו-Pf) מעיד על תוצאה שלילית.הבדיקה מכילה בקרה פנימית (פס C) אשר אמורה להציג פס בצבע בורדו של קומפלקס האימונו של IgG נגד עכבר עז / IgG של עכבר (מצמידים של pHRP-II ו-pLDH-זהב) ללא קשר להתפתחות הצבע בכל אחת מרצועות הבדיקה.אחרת, תוצאת הבדיקה אינה חוקית ויש לבצע בדיקה חוזרת של הדגימה עם מכשיר אחר.
