תקציר והסבר הבדיקה
מלריה היא מחלה המוליטית הנישאת על ידי יתושים, מחלת חום שמדביקה למעלה מ-200 מיליון אנשים והורגת יותר ממיליון איש בשנה.זה נגרם על ידי ארבעה מינים של Plasmodium: P. falciparum, P. vivax, P. ovale ו-P. malariae.הפלסמודיות הללו כולן מדביקות והורסות אריתרוציטים אנושיים, ומייצרות צמרמורות, חום, אנמיה וטחול.P. falciparum גורם למחלה חמורה יותר משאר המינים הפלסמודיים ומהווה את רוב מקרי המוות ממלריה.P. falciparum ו-P. vivax הם הפתוגנים הנפוצים ביותר, עם זאת, יש שונות גאוגרפית ניכרת בתפוצת המינים.
באופן מסורתי, מלריה מאובחנת על ידי הדגמה של האורגניזמים על גבי מריחות עבות של דם היקפי מוכתם Giemsa, והמינים השונים של פלסמודיום נבדלים על ידי הופעתם באריתרוציטים נגועים.הטכניקה מסוגלת לאבחן מדויק ומהימן, אך רק כאשר מבוצעת על ידי מיקרוסקופים מיומנים תוך שימוש בפרוטוקולים מוגדרים, מה שמציב מכשולים עיקריים לאזורים המרוחקים והעניים בעולם.
מבחן Malaria Pf/Pv Ag Rapid Test פותח לפתרון מכשולים אלו.הוא משתמש בנוגדנים ספציפיים ל-P. falciparum Histidine Rich Protein-II (pHRP-II) ול-P. vivax Lactate Dehydrogenase (Pv-LDH) כדי לזהות ולהבדיל בו-זמנית זיהום עם P. falciparum ו-P. vivax.הבדיקה יכולה להתבצע על ידי צוות לא מיומן או מיומן מינימלי, ללא ציוד מעבדה
עִקָרוֹן
הבדיקה המהירה של Malaria Pf/Pv Ag היא בדיקה חיסונית כרומטוגרפית של זרימה רוחבית.רכיבי בדיקת הרצועה מורכבים מ: 1) רפידה מצומדת בצבע בורדו המכילה נוגדן אנטי-Pv-LDH לעכבר מצומד עם זהב קולואידי (Pv-LDH-גולד מצומדים) ונוגדן אנטי-pHRP-II של עכבר מצומד עם זהב קולואידי (pHRP-II-גולד מצומדים המכילים רצועות Pv-LDH) ושתי פסי רצועת ממברנה a רצועת תלולוז (Pv-LDH-gold conjugates) (להקת C).רצועת ה-Pv מצופה מראש בנוגדן אחר לעכבר אנטי-Pv-LDH ספציפי לזיהוי זיהום ב-Pv, רצועת ה-Pf מצופה מראש בנוגדנים פוליקלונליים אנטי-pHRP-II לזיהוי זיהום Pf, ורצועת C מצופה ב-IgG נגד עכברים של עיזים.
במהלך הבדיקה, נפח הולם של דגימת הדם מופק לתוך באר הדגימה (S) של קלטת הבדיקה, מאגר תמוגה מתווסף לבאר המאגר (B).המאגר מכיל חומר ניקוי המסנן את תאי הדם האדומים ומשחרר אנטיגנים שונים, הנודדים בפעולה נימית על פני הרצועה המוחזקת בקסטה.Pv-LDH אם קיים בדגימה ייקשר לצמידות ה-Pv-LDH-זהב.לאחר מכן, הקומפלקס האימונו נלכד על הממברנה על ידי הנוגדן האנטי-Pv-LDH המצופה מראש, ויוצר פס Pv בצבע בורדו, המעיד על תוצאת בדיקה חיובית של Pv.לחלופין, pHRP-II אם קיים בדגימה ייקשר לצימודים של pHRP-II-זהב.לאחר מכן, הקומפלקס האימונו נלכד על הממברנה על ידי נוגדני האנטי-pHRP-II המצופים מראש, ויוצרים פס Pf בצבע בורדו, המעיד על תוצאת בדיקה חיובית של Pf.היעדר רצועות בדיקה כלשהן מעיד על תוצאה שלילית.הבדיקה מכילה בקרה פנימית (רצועת C) שאמורה להציג פס בצבע בורדו של קומפלקס האימונו של IgG עז נגד עכבר / עכבר IgG (אנטי-Pv-LDH ואנטי-pHRPII)-זהב, ללא קשר להתפתחות הצבע בכל אחת מרצועות הבדיקה.אחרת, תוצאת הבדיקה אינה חוקית ויש לבצע בדיקה חוזרת של הדגימה עם מכשיר אחר.
